Développement de nouvelles sondes oligonucleotidiques fluorescentes pour l'analyse des acides nucléiques

De nouvelles sondes oligonucléotidiques fluorescentes spécifiques des structures d acides nucléiques en double brin ont été obtenues. Ces oligonucléotides formant des triples hélices, sont liés par leurs extrémités 5 -ou/et 3 à une série de marqueurs fluorescents de la famille des cyanines monométhi...

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Autore principale: Renard, Brice-Loic
Natura: Thèse numérique
Lingua:Français
Pubblicazione: Villeurbanne : [CCSD] 2009.
Soggetti:
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Accès Université d'Orléans
Nota: Description d'après la consultation, 2018-04-26
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Cette édition peut différer de la version de soutenance enregistrée sous le Numéro National de Thèse : 2008ORLE2062
Thèses CCSD
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Variante du titre:Developement of new fluorescent oligonucleotide probes for nucleic acids analysis
Edition sous un autre format:• Développement de nouvelles sondes oligonucleotidiques fluorescentes pour l'analyse des acides nucléiques, par Brice-Loïc Renard, [S.l.], [s.n.], 2008, 1 vol. (176 p.)
Descrizione
Riassunto:De nouvelles sondes oligonucléotidiques fluorescentes spécifiques des structures d acides nucléiques en double brin ont été obtenues. Ces oligonucléotides formant des triples hélices, sont liés par leurs extrémités 5 -ou/et 3 à une série de marqueurs fluorescents de la famille des cyanines monométhines possédant des propriétés intercalantes, par des bras polyméthylènes de longueur variable. Dans tous les cas, l hybridation des sondes avec les cibles en double brin s accompagne d une forte augmentation de l intensité du signal fluorescent émis qui dépend de la structure de la cyanine et des paramètres de sa liaison aux oligonucléotides. En présence d une cible simple brin, les modifications du signal ne sont pas significatives. La présence du marqueur stabilise les triples hélices. Les sondes comportant le thiazole orange, attaché par le noyau benzothiazole via un bras de liaison à huit méthylènes, présente le meilleur compromis en termes de stabilisation, d intensité de fluorescence et d augmentation d intensité de fluorescence lors de l hybridation. Dans le but d obtenir de nouvelles sondes utilisables en milieu cellulaire et in vivo, de nouveaux marqueurs fluorescents de type squaraine ont été synthétisés et couplés pour la première fois, à notre connaissance, à des oligonucléotides. Les conjugués correspondant émettent un signal fluorescent détectable au-delà de 650 nm et possèdent des rendements quantiques de fluorescence élevés. La photostabilité des marqueurs et des conjugués, en milieu acide faible et à 37 ů a été fortement augmentée après incorporation d atomes de fluor sur le squaraine.
Descrizione del documento:Description d'après la consultation, 2018-04-26
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