Avaliação do papel de mastócitos e histamina na resposta imune da tuberculose experimental murina
A tuberculose (TB) é uma doença pulmonar que se caracteriza por uma reaçao inflamatéria aguda seguida de uma fase crônica corn predominância de lesoes granulomatosas. As caracteristicas da imunidade celular do hospedeiro determinam o grau das manifestaçoes clinicas na tuberculose, sendo a interaçao...
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| Κύριος συγγραφέας: | |
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| Άλλοι συγγραφείς: | , |
| Μορφή: | Thèse et Mémoire papier |
| Γλώσσα: | Portugais Anglais |
| Έκδοση: |
[S.l.] :
[s.n.]
2008.
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| Θέματα: | |
| Σημείωση: |
Textes en portugais et en anglais Thèse soutenue en co-tutelle |
| Autres localisations: | Voir dans le Sudoc |
| Variante du titre: | Evaluation du rôle des mastocytes et de l'histamine dans la réponse immune de la tuberculose Evaluation of mast cell and histamine role in the immune response of the murine tuberculosis |
| Περίληψη: | A tuberculose (TB) é uma doença pulmonar que se caracteriza por uma reaçao inflamatéria aguda seguida de uma fase crônica corn predominância de lesoes granulomatosas. As caracteristicas da imunidade celular do hospedeiro determinam o grau das manifestaçoes clinicas na tuberculose, sendo a interaçao entre células T e macréfagos, que sac as principais células efetoras que participam desta infecçao, fundamental para 0 controle desta doença. Entretanto, outros tipos celulares como células dendriticas, células endoteliais, e mais recentemente mastécitos parecem estar envolvidos nos mecanismos imunolégicos desencadeados como decorrência da infecçao pelo M. tuberculosis (MTB). Na primeira fase do nosso trabalho, investigamos 0 papel dos mast6citos na fase aguda da infecçao por MTB. Por isso, foram utilizados camundongos infectados, tratados ou naD corn composto 48/80, um agente farmacolégico que causa a desgranulaçao de mastécitos. Apés 15 de infecçao, ocorreu intensa reaçao inflamatéria pulmonar, corn predominio de neutréfilos e células mononucleares decorrente da produçao de mediadores tais como TNF-u, IL-1, IL-6, KC, MCP-1 e MIP-2 no local inflamado. Todavia, apés a desgranulaçao de mastécitos corn composto 48/80, houve diminuiçao marcante do recrutamento das células inflamatérias para 0 espaço broncoalveolar, sendo que este evento se correlacionou corn a queda na liberaçao dos mediadores pré-inflamatérios nos pulmoes. Adicionalmente, mostramos que a desgranulaçao dos mastécitos de animais infectados induziu reduçao na sintese das citocinas da resposta imune celular e maior numero de UFC foi recuperado nos pulmoes destes animais. Em etapa posterior, elucidamos a importância de TLR2 na ativaçao dos mastécitos na fase crônica da infecçao por MTB. Apés 60 dias de infecçao, animais TLR2-1apresentaram declinio do numero de neutréfilos e células mononucleares no LBA decorrente de ineficiente produçao de mediadores pré-inflamatérios como TNF-u, IL-1 e IL-6 nos pulmoes. Todavia, apés infusao sistêmica de mastécitos, houve normalizaçao do recrutamento de células inflamatérias, sendo que este evento correlacionou corn aumento da liberaçao de mediadores pré-inflamatérios nos pulmoes. Adicionalmente, mostramos que a transferência adotiva de mast6citos em animais TLR2-1- infectados induziu elevaçao dos nfveis das citocinas da resposta imune celular tais como IL-12, IFN-y e IL-10, restabelecimento da formaçao de granulomas e menor numero de UFC foi recuperado nos pulm5es. Também verificamos que animais TLRZ1- infectados apresentaram deficiência no influxo de linf6citos CDS+, mas na presença de mast6citos positivos para TLR2 houve reversao da capacidade destas células em migrarem para 0 foco infeccioso. Assim, estes resultados complementares pressup5em que a ativaçao de mast6citos dependente de TLR2 representa um mecanismo efetor no controle da infecçao crônica por MTB. O principal componente dos grânulos de mast6citos é a histamina, uma amina vasoativa produzida sob à açao da enzima histidina descarboxilase. Entretanto, alguns estudos recentes têm relatado a importância da histamina na defesa do hospedeiro contra infecç5es. Por isso, resolvemos explorar 0 papel da histamina nos mecanismos de defesa durante a infecçao por MTB usando camundongos deficientes da enzima histidina descarboxilase (HDC-I-) e também realizamos 0 tratamento dos animais infectados corn antagonistas de receptores para histamina (HR). De acordo corn os resultados, 0 tratamento dos animais infectados corn pirilamine (antagonista do H1R) ocasionou menor infiltrado inflamat6rio no LBA acompanhado de queda da liberaçao de KC e MIP-2, decréscimo da sfntese de IL-12 e aumento dos nfveis de IL-10, que resultou em preservaçao do parênquima pulmonar. Por outro lado, observamos intensa reaçao inflamat6ria, elevaçao da sfntese de TNF-a., IFN-y e NO ap6s 0 tratamento corn cimetidine (antagonista do H2R), que culminou em injuria pulmonar. Os resultados também comprovaram que histamina é liberada ap6s infecçao por MTB e que camundongos HDC-I- exibiram reduçao da carga bacilar associada ao aumento do infiltrado linfocftico, modulaçao das citocinas TNF-a.e IL-S, amplificaçao da resposta Th1 e da atividade microbicida de macr6fagos. Assim, 0 presente projeto, através de abordagens experimentais multiplas e consistentes, suporta idéias postuladas da Iiteratura, de que mast6citos e seus mediadores, principalmente a histamina, medeiam eventos importantes da resposta imune inata e adaptativa na TB experimental. La tuberculose est une maladie infectieuse des poumons caractérisée par une inflammation aiguë suivie d'une phase chronique avec formation de granulomes. La présentation d'épitopes du bacille Mycobactérium tuberculosis (MTB) aux cellules T, par des macrophages et d'autres cellules présentatrices d'antigènes permet d'initier la réponse immune cellulaire essentielle pour le développement d'une résistance de l'hôte. Néanmoins, beaucoup d'autres composants cellulaires et des facteurs innés sont impliqués dans le contrôle immunologique de l'infection par MTB. Dans notre étude, nous avons tout d'abord évalué le rôle des mastocytes durant la phase aiguë de l'infection par MTB. Dans ce but, nous avons traité les souris infectées avec 48/80, un agent pharmaceutique qui provoque une dégranulation des mastocytes. Au quinzième jour postinfection, les souris subissaient une inflammation intense avec accumulation de neutrophiles et de cellules mononucléaires, qui corrélait avec de hauts niveaux en TNF-a, IL-1, IL-6, KC, MCP-1 et MIP-2 dans les régions enflammées. Lorsque les mastocytes étaient préalablement dégranulés par 48/80, nous avons observé une diminution de l'influx de cellules inflammatoires dans les espaces alvéolaires et moins de médiateurs proinflammatoires dans les poumons. De plus, suite à la dégranulation des mastocytes, la charge en mycobactéries était de manière consistante plus haute dans les poumons de ces souris. Nous avons ensuite analysé l'importance de TLR2 dans l'activation des mastocytes, durant la phase chronique de l'infection par MTB. Au jour 60 après l'infection par MTB, les souris TLR2-1- ont montré des nombres de neutrophiles et de cellules mononucléaires plus réduits dans les fluides de lavages broncho-alvéolaires (BALF), que les souris contrôles, probablement à cause d'une production inefficace de médiateurs proinflammatoires comme TNF-a, IL-1, IL-6 et un défaut dans la formation de granulomes. L'infusion systémique de mastocytes dérivant de souris TLR2+1+ normalise le recrutement cellulaire et le niveau des cytokines proinflammatoires dans les poumons de souris TLR2-1- . De plus, ce transfert adoptif corrige la plus grande susceptibilité aux infections par MTB de souris TLR2-1-, grâce à l'augmentation de la production de cytokines telles que IL-12, IFN-y et IL-10. En définitif, le transfert de mastocytes dérivés de souris exprimant les TLR2 dans des souris déficientes en TLR2, confère une résistance à l'infection, augmente le recrutement de cellules T CD8+ et la capacité à former des granulomes dans le poumon. De cela, nous pouvons conclure que le TLR2 des mastocytes, en reconnaissant MTB permet à ces cellules de s'activer, un phénomène essentiel pour le contrôle de l'infection chronique induite par MTB. De plus nous avons étudié le rôle joué par l'histamine dans le contrôle de l'infection par MTB. En effet le principal composé contenu dans les granules préformées des mastocytes est l'histamine, une amine vasoactive, qui nécessite l'histidine décarboxylase pour sa synthèse. Il avait été rapporté précédemment que l'histamine est active dans d'autres maladies infectieuses. Nous avons notamment utilisé dans nos études d'infection par MTB, des antagonistes des récepteurs de l'histamine (HR). Nous avons pu observé que le pyrilamine, un antagoniste de HR1, donné à des souris infectées par MTB réduisait l'influx de cellules dans le BALF, suivi d'une chute du niveau de KC et de MIP-2 et d'une diminution de la libération d'IL-12 et augmentation d'IL-10 induite dans la préservation du parenchyme pulmonaire. D'autre part, cimetidine, un antagoniste de HR2 augmentait l'inflammation, avec de plus hauts niveaux de d'IFN-y, TNF-a. et NO conduire à des lésions pulmonaires. Enfin, nous avons voulu poursuivre l'exploration du rôle des mastocytes et de l'histamine dans la résistance au cours de l'infection par MTB, en utilisant des souris déficientes en histidine decarboxylase (HDC-J-). Dans ces expériences, nous avions décidé de récupérer les échantillons après 28 jours d'infections parce que cette période inclut la fin de la phase aiguê de l'infection et l'initiation de la phase chronique. Tout d'abord, nous avons détecté de hauts niveaux d'histamine dans les homogénats de poumons de souris C57BL/6 infectées par MTB. Comme attendu, il y avait une diminution significative des niveaux de ce médiateur dans les poumons de souris HOC. Nos études aussi confirmaient que les souris HDC-I- avaient une charge bactérienne réduite associée à une augmentation d'infiltration de lymphocytes, à une modulation de la production de TNF-a. et d'IL-6 et à un taux élevé de cytokines Th1 dans les poumons, cela en comparaison avec des souris contrôles. En conclusion, nous avons démontré en utilisant différentes approches, que les mastocytes et leur produits, notamment l'histamine, sont d'importants médiateurs des réponses immunitaires innées mais aussi adaptatives contrôlant l'infection expérimentale par MTB. |
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| Περιγραφή τεκμηρίου: | Textes en portugais et en anglais Thèse soutenue en co-tutelle |
| Φυσική περιγραφή: | 1 vol. (pagination multiple 151-[105] f.) : ill. en noir et en coul. ; 30 cm. |
| Βιβλιογραφία: | Bibliogr. à la fin de chaque partie |