Influence du taux d'oxygénation et du photovieillissement sur l'activité antioxydante des cellules de la peau
Ces dernières décennies ont été marquées par le développement de modèles de peau in vitro qui se rapprochent de plus en plus de la physiologie du tissu cutané in vivo, ceci pour trouver des modèles alternatifs aux animaux de laboratoire. Malgré ces progrès, le microenvironnement cutané n'est pa...
Enregistré dans:
| Auteur principal: | |
|---|---|
| Autres auteurs: | , , , , |
| Format: | Thèse numérique |
| Langue: | Français |
| Publié: |
2022.
|
| Sujets: | |
| Accès en ligne: | Accès au texte intégral https://theses.univ-orleans.fr/public/2022ORLE1042_va.pdf http://www.theses.fr/2022ORLE1042/abes https://theses.hal.science/tel-04860565 |
| Note: |
Titre provenant de l'écran-titre Ecole(s) Doctorale(s) : École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire ; 2012-....) Partenaire(s) de recherche : Centre de biophysique moléculaire (Orléans ; 1967-....) (Laboratoire) Autre(s) contribution(s) : Emilie Destandau (Président du jury) ; Claire Crola Da Silva (Membre(s) du jury) ; Michel Simon, Hamid Reza Rezvani (Rapporteur(s)) |
| Autres localisations: | Voir dans le Sudoc |
| Variante du titre: | Effects of oxygen levels and photoaging on cutaneous antioxidant activity |
| Résumé: | Ces dernières décennies ont été marquées par le développement de modèles de peau in vitro qui se rapprochent de plus en plus de la physiologie du tissu cutané in vivo, ceci pour trouver des modèles alternatifs aux animaux de laboratoire. Malgré ces progrès, le microenvironnement cutané n'est pas tout à fait respecté, en particulier la pression partielle en oxygène. En effet, les niveaux physiologiques d'oxygène dans la peau varient de 1,5% à 7% (physioxie). Cependant, les modèles se font au taux d'oxygène atmosphérique (~18,6% O2 dans les incubateurs), donc les cellules cutanées se trouvent en hyperoxygénation. Bien que l'oxygène soit la principale source d'énergie des cellules, il est aussi connu comme le précurseur des espèces réactives de l'oxygène (ROS) qui sont impliquées dans le stress oxydant décrit comme la principale cause du photovieillissement. L'objectif de ce travail de thèse a été d'étudier l'influence du taux d'oxygénation sur le stress oxydant dans la peau. La première étape a consisté à établir de nouveaux modèles de culture des cellules de l'épiderme, 2D et 3D, en physioxie, puis à caractériser leurs capacités antioxydantes par l'évaluation de la production de ROS et des enzymes associées (SODs, Catalase et GPXs). La seconde partie a consisté à reproduire le processus du photovieillissement par irradiation UV en physioxie, et à évaluer les capacités antioxydantes en comparaison avec le modèle classique en normoxie. Dans un premier temps, nous avons démontré une meilleure résistance des cellules (modèle 2D) en physioxie contre un stress oxydant qui est due à la régulation du taux basal des enzymes antioxydantes en physioxie, avec une suractivation de la catalase et une surproduction de la SOD2. Ces résultats ont été confirmés dans un modèle plus physiologique des épidermes reconstruits en physioxie. Dans un second temps, nos résultats montrent que les mêmes enzymes sont aussi modulées en réponse aux irradiations UV dans des modèles mimant le photovieillisement. Cette condition d'oxygénation physiologique après irradiation par les UV induit une surexpression rapide de la SOD2 et une translocation de la SOD1 dans les noyaux, suggérant ainsi un nouveau rôle de cette enzyme en réponse à un stress oxydant. Cette étude établit pour la première fois un lien entre le taux d'oxygénation et les capacités antioxydantes de la peau. En conséquence, ces résultats mettent en évidence l'importance de respecter la physioxie pour mieux comprendre le stress oxydant et le photo-vieillissement. In recent years, the development of in vitro skin models that approximate the physiology of skin tissue in vivo has occurred, thus, to find alternative models to laboratory animals. However, the skin microenvironment is not completely respected, especially the partial pressure of oxygen. In fact, physiological oxygen levels in the skin range from 1.5% to 7%, physioxia. However, these models are usually performed at atmospheric oxygen levels (~18.6% O2 in incubators), so, skin cells are in a hyperoxic environment. While oxygen is the main source of cell energy, it is also known to be the precursor of reactive oxygen species (ROS) which are involved in the oxidative stress reported as the major cause of photoageing. My thesis work focused on the effect of oxygenation levels on oxidative stress in the skin. The first step was to develop new 2D and 3D models of epidermal cells in physioxia, and then to characterize their antioxidant potential by the evaluation of ROS production and associated enzymes (SODs, Catalase and GPXs). The second part of the study was to reproduce the process of photoaging by UV irradiation under physioxia and compare the antioxidant capacities with the classic normoxia model. Firstly, we demonstrated a better resistance of cells (2D model) in physioxia against oxidative stress. This was due to the upregulation of the basal levels of antioxidant enzymes in physioxia, with an overactivation of catalase and an overproduction of SOD2. These results were further confirmed in a more physiological model, the reconstructed epidermis in physioxia. In a second step, the same enzymes were also modulated in response to UV irradiation in models mimicking photoageing. Following UV irradiation, the physiological oxygenation condition induces a quick overexpression of SOD2 as well as the translocation of SOD1 into the nuclei, suggesting a new involvement of this enzyme in oxidative stress response. This is the first time that a study links the oxygen level to oxidative stress in the skin. These results, therefore, illustrate the importance of respecting skin physiology to better understand oxidative stress and photoaging. |
|---|---|
| Description: | Titre provenant de l'écran-titre Ecole(s) Doctorale(s) : École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire ; 2012-....) Partenaire(s) de recherche : Centre de biophysique moléculaire (Orléans ; 1967-....) (Laboratoire) Autre(s) contribution(s) : Emilie Destandau (Président du jury) ; Claire Crola Da Silva (Membre(s) du jury) ; Michel Simon, Hamid Reza Rezvani (Rapporteur(s)) |
| Format: | Configuration requise : un logiciel capable de lire un fichier au format : PDF |
| Accès: | Thèse soumise à l'embargo de l'auteur jusqu'au 31 décembre 2024 |