Dissection du mécanisme de terminaison-antiterminaison au niveau du terminateur tR1 du phage lambda : application à l'étude des complexes ARN-protéine in vivo

Chez Escherichia coli la terminaison de la transcription peut intervenir selon deux mécanismes distincts : tout d'abord la terminaison intrinsèque qui correspond à une séquence ADN, codant pour une structure en tige boucle riche en GC suivie d'une répétition d'uridine sur l'ARN,...

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1. Verfasser: Vieu, Erwann, 1976-
Format: Thèse numérique
Sprache:Français
Veröffentlicht: Villeurbanne : [CCSD] 2005.
Schlagworte:
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Accès Université d'Orléans
Anmerkung: Description d'après la consultation, 2018-04-26
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Cette édition peut différer de la version de soutenance enregistrée sous le Numéro National de Thèse : 2004ORLE2075
Thèses CCSD
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Variante du titre:Dissection of the termination-antitermination mecanisms at lambda tR1 terminator :, application for the study of RNA-protein complexes in vivo
Edition sous un autre format:• Dissection du mécanisme de terminaison-antiterminaison au niveau du terminateur tR1 du phage lambda, application à l'étude des complexes ARN-protéine in vivo, par Erwann Vieu, [S.l.], [s.n.], 2004, 1 vol. (141 f.)
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500 |a Cette édition peut différer de la version de soutenance enregistrée sous le Numéro National de Thèse : 2004ORLE2075 
500 |a Thèses CCSD 
502 |a Texte remanié de. Thèse de doctorat. Aspect cellulaire et moléculaire de la biologie. Orléans. 2004 
520 |a Chez Escherichia coli la terminaison de la transcription peut intervenir selon deux mécanismes distincts : tout d'abord la terminaison intrinsèque qui correspond à une séquence ADN, codant pour une structure en tige boucle riche en GC suivie d'une répétition d'uridine sur l'ARN, induisant le relargage de l'ARN polymérase. Le second mécanisme est gouverné par un facteur de terminaison nommé Rho qui gouverne environ 50% des évènements de terminaison chez E. coli. Au cours de ma thèse, je me suis interessé à ce deuxième mécanisme, et plus particulièrement à sa régulation in vivo (antiterminaison). Rho, sous la forme d'un anneau héxamèrique, se fixe à l'ARN naissant au niveau d'un site d'entrée (également appelé RUT), puis utilise son activité ATPase pour longer l'ARN et disssocier le complexe ternaire d'élongation stoppé au niveau d'un site de pause. Les terminateurs Rho-dépendants sont assez mal définis et peu d'entre eux ont été analysés en détail. Le terminateur tR1 du phage lambda (l) est le terminateur Rho-dépendant le plus étudié à la fois in vitro et in vivo. La terminaison Rho-dépendante au niveau de ce terminateur est gouvernée principalement par les séquences localisées en 5', codant deux régions du transcript nommées RUTA et RUTB. Ces deux régions sont séparées par le motif ARN BOXB qui n'est pas indispensable à l'action de Rho mais sert, dans le mécanisme d'antiterminaison, de site de fixation pour la protéine N du phage l. Grâce à un système minimal d'étude in vivo, nous avons montré que le motif BOXB possède une fonction double dans les mécanismes de terminaison/antiterminaison au niveau de ltR1 régulant l'expression temporale du génome du phage l. Sous la forme d'une tige boucle hautement structurée, BOXB agit comme un lien permettant de placer RUTA et RUTB l'un à coté de l'autre pour une interaction optimale avec Rho et une terminaison efficace. A l'inverse, la fixation de la protéine N sur BOXB induit l'antiterminaison au niveau de ltR1 en empèchant l'accès de Rho à l'ARN. Ce double rôle à été démontré in vivo en substituant au couple N/BOXB la "coat protein" du phage MS2 et son motif cible en tige boucle. En complément de ce travail, j'ai utilisé cette faculté d'un complexe ribonucléoprotéique de bloquer la terminaison Rho-dépendante, pour développer une nouvelle approche d'étude, in vivo, des complexes ARN-protéine. 
538 |a Un logiciel capable de lire un fichier au format PDF 
650 |a Escherichia coli 
650 |a Transcription génétique 
650 |a GTPases Rho 
650 |a Interactions ARN-protéine 
650 |a Bactériophage lambda 
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