Mécanismes et régulation d'une ARN hélicase essentielle chez E. coli : le facteur de terminaison de la transcription bactérienne Rho

Chez E. coli, Rho est un facteur essentiel qui contrôle l expression de multiples unités transcriptionnelles via le phénomène de terminaison de la transcription. Rho est un moteur moléculaire ATP-dépendant ayant une activité ARN hélicase caractéristique de sa capacité à dissocier des obstacles (comm...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Rabhi, Makhlouf, 1983-
Další autoři: Boudvillain, Marc, 19..-...., biophysicien (Vedoucí práce, Oponent)
Médium: Thèse numérique
Jazyk:Français
Anglais
Vydáno: 2011.
Témata:
On-line přístup:Accès réservé au texte intégral
Poznámka: Titre provenant de l'écran-titre
Ecole(s) Doctorale(s) : École doctorale Sciences et technologies (Orléans ; 2009-2012)
Partenaire(s) de recherche : Centre de biophysique moléculaire (Orléans ; 1967-....) (Laboratoire)
Autre(s) contribution(s) : Alain Legrand (Président du jury) ; Marc Boudvillain, Alain Legrand, Emmanuelle Delagoutte, Xu-Guang Xi, Olivier Espeli, Rachid Rahmouni (Membre(s) du jury) ; Emmanuelle Delagoutte, Xu-Guang Xi (Rapporteur(s))
Autres localisations: Voir dans le Sudoc
Variante du titre:Mechanisms and regulation of an essential RNA helicase in E. coli :, the bacterial transcription termination factor Rho
LEADER 05522nam a22003137a 4500
001 408210
008 111025s2011 xxe ||| |||| 00| 0 fre d
009 PPN155855719
041 0 |a fre  |a eng  |b fre  |b eng 
084 |a 570 
100 1 |a Rabhi, Makhlouf,  |d 1983- 
240 1 0 |a Mechanisms and regulation of an essential RNA helicase in E. coli :  |b the bacterial transcription termination factor Rho 
245 1 0 |a Mécanismes et régulation d'une ARN hélicase essentielle chez E. coli :  |b le facteur de terminaison de la transcription bactérienne Rho   |c Makhlouf Rabhi ; sous la direction de Marc Boudvillain. 
256 |a Données textuelles 
260 |c 2011. 
500 |a Titre provenant de l'écran-titre 
500 |a Ecole(s) Doctorale(s) : École doctorale Sciences et technologies (Orléans ; 2009-2012) 
500 |a Partenaire(s) de recherche : Centre de biophysique moléculaire (Orléans ; 1967-....) (Laboratoire) 
500 |a Autre(s) contribution(s) : Alain Legrand (Président du jury) ; Marc Boudvillain, Alain Legrand, Emmanuelle Delagoutte, Xu-Guang Xi, Olivier Espeli, Rachid Rahmouni (Membre(s) du jury) ; Emmanuelle Delagoutte, Xu-Guang Xi (Rapporteur(s)) 
502 |a Thèse de doctorat. Biologie moléculaire et cellulaire. Orléans. 2011 
520 |a Chez E. coli, Rho est un facteur essentiel qui contrôle l expression de multiples unités transcriptionnelles via le phénomène de terminaison de la transcription. Rho est un moteur moléculaire ATP-dépendant ayant une activité ARN hélicase caractéristique de sa capacité à dissocier des obstacles (comme l ARN polymérase) lors de sa translocation le long de sa piste ARN. Il existe différentes structures de Rho en interaction avec l ARN qui suggèrent des mécanismes de translocation contradictoires. Afin de mieux comprendre ces mécanismes, nous avons utilisé deux approches complémentaires pour identifier les fonctionnalités moléculaires importantes au sein de l ARN et de Rho : l approche NAIM (Nucleotide Analog Interference Mapping) développée au laboratoire et la mutagenèse dirigée. Nos résultats excluent une organisation de l anneau hexamérique en trimère de dimère (ainsi que les mécanismes de translocation qui en découlent) mais sont compatibles avec différents aspects rencontrés dans une structure en anneau asymétrique plus récente. Toutefois, nos résultats ne supportent pas le mécanisme d escorte nucléotide par nucléotide qui découle de cette structure asymétrique. Ainsi, nous montrons que Rho contacte la chaîne ARN de façon hétérogène et ne nécessite un groupement 2 -OH que tous les sept nucléotides en moyenne. Par ailleurs, nous avons exploré l interactome d E. coli dans le but d identifier d éventuels régulateurs de la fonction de Rho. Nous montrons que la protéine hexamèrique Hfq présente une similitude topologique avec les protéines endogènes NusG et YaeO et que, comme elles, Hfq s associe à Rho pour en réguler la fonction. L interaction Hfq:Rho inhibe les activités enzymatiques de Rho. Ces résultats révèlent un nouveau mécanisme d anti-terminaison de la transcription avec diverses implications possibles dans le métabolisme bactérien et/ou la virulence de germes pathogènes. 
520 |a In E. coli, Rho is an essential factor that controls the expression of multiple transcriptional units via the phenomenon of transcription termination. Rho is an ATP-dependent molecular motor displaying RNA helicase activity, a feature typical of Rho s ability to dissociate obstacles (such as RNA polymerase) during translocation along its RNA track. Different structures of the Rho-RNA complex have been published and suggest contradictory mechanisms of translocation. In order to understand these mechanisms, we have used two complementary approaches to identify functionality molecular comports in RNA and Rho : the NAIM (Nucleotide Analog Interference Mapping) approach developed in the laboratory and site-directed mutagenesis. Our results exclude that Rho forms a functional "trimer of dimer" ring (which rules out related translocation mechanisms) but are compatible with various aspects encountered in a recent asymmetric ring structure. However, our results do not support the "nucleotide by nucleotide" escort mechanism inferred from this asymmetric structure. Indeed, we show that Rho forms heterogonous contacts with the RNA chain and only requires a 2'-OH every seven nucleotides on average. Furthermore, we explored the interactome of E. coli in order to identify potential regulators of Rho function. We show that the hexameric protein Hfq displays topological similarity with the endogenous proteins NusG and YaeO and, that, like them, Hfq associates with Rho to regulate Rho function. The Hfq:Rho interaction inhibits the enzymatic activities of Rho. These results reveal a novel mechanism of transcription anti-termination with potentially important implications in bacterial metabolism and/or virulence of pathogens. 
650 |a Escherichia coli 
650 |a Hélicases 
650 |a Thèses et écrits académiques 
700 1 |a Boudvillain, Marc,  |d 19..-....,  |c biophysicien.  |4 ths  |4 opn 
710 2 |a Université d'Orléans.  |4 dgg 
856 4 |5 452349901:879910259  |q PDF  |s 18143484  |u https://theses.univ-orleans.fr/prive/acceslocal/2011ORLE2008.pdf  |z Accès réservé au texte intégral 
997 |0 408210  |1 Thèse numérique  |a Ressource numérique  |b INSA  |b ENSA  |c 0/Bibliothèque numérique/  |c 1/Bibliothèque numérique/Autre ressource numérique/